Книга: Медицинская микробиология, иммунология и вирусология
Реакция иммунофлуоресценции
<<< Назад Реакция преципитации и ее варианты |
Вперед >>> Серологические реакции, протекающие с участием комплемента |
Реакция иммунофлуоресценции
Молекулы иммуноглобулинов способны необратимо связываться (метиться) с некоторыми химическими веществами без потери своей антительной специфичности и свойства связываться с антигеном. Для такого мечения можно использовать красители, флуоресцирующие при облучении их коротковолновым светом (ультрафиолетовым, фиолетовым, синим), например изотиоционат флуоресцеина, дающий зеленовато-желтое окрашивание, или другие флуорохромы. Использование для обнаружения антигенов меченных флуорохромами антител, т. е. реакцию иммунофлуоресценции (РИФ), предложил в 1950 г. А. Кунс. С помощью РИФ можно быстро обнаруживать даже ничтожные количества антигенов, в том числе бактериальных и вирусных, по эффекту флуоресценции комплекса антиген + антитело в люминесцентном микроскопе.
Метод иммунофлуоресценции используют в двух вариантах. Один из них получил название прямого метода РИФ, и в этом случае метят антитела, которые непосредственно участвуют в реакции с исследуемым антигеном. Второй вариант известен под названием непрямого метода РИФ. В этом случае с исследуемым антигеном вначале взаимодействуют специфические к нему антитела, а уже с ними взаимодействуют антивидовые антитела (антитела против иммуноглобулинов диагностической сыворотки), меченные флуорохромом (рис. 74). Преимуществом непрямого метода РИФ является то, что при его использовании отпадает необходимость иметь большой набор различных специфических флуоресцирующих антител, так как он основан на использовании антиглобулиновых антител. В качестве последних обычно используют сыворотку козы или барана, иммунизированных сывороткой кролика (коммерческие диагностические иммунные сыворотки чаще всего готовят путем иммунизации кроликов). Непрямой метод иммунофлуоресценции применяют не только для ускоренного обнаружения антигенов (возбудителя), но и для обнаружения антител в сыворотке крови больных. Например, для серологической диагностики токсоплазмоза токсоплазмы фиксируют на предметном стекле и обрабатывают сывороткой исследуемого больного. После ее отмывки мазок повторно обрабатывают сывороткой, содержащей меченные флуорохромом антитела против человеческого глобулина. Если в крови больного есть антитела, т. е. человек болен, в люминесцентный микроскоп будут видны светящиеся токсоплазмы.
Рис. 74. Схема прямого (а) и непрямого (б) методов иммунофлуоресценции
<<< Назад Реакция преципитации и ее варианты |
Вперед >>> Серологические реакции, протекающие с участием комплемента |
- Реакция агглютинации
- Реакция преципитации и ее варианты
- Реакция иммунофлуоресценции
- Серологические реакции, протекающие с участием комплемента
- Реакция связывания комплемента
- Серологические реакции, протекающие с участием фагоцитов
- Реакции иммуносорбентного анализа твердой фазы
- Обнаружение антигена с помощью ИФМ и РИМ
- Обнаружение специфических антител с помощью ИФМ и РИМ
- Реакции нейтрализации
- 6.63. РЕАКЦИЯ ПОДГОНЯЕТ САМА СЕБЯ
- Реакция агглютинации
- Глава 3.2. Реакция диких копытных на хищных: — инстинкт или традиция?
- Реакция простейших на зону от НЛО
- Цепная реакция видообразования
- Реакция клетки-мишени
- Реакция за рубежом
- ДНКовая цепная реакция
- Реакция преципитации и ее варианты
- Реакция связывания комплемента
- Варианты ускоренных реакций агглютинации. Реакция пассивной гемагглютинации и ее варианты
- 8.19. РЕАКТИВ И РЕАКЦИЯ ЧУГАЕВА